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染色质免疫共沉淀

染色质免疫共沉淀

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染色免疫共沉淀

真核生物的基因组DNA以染色的形式存在,研究蛋白与DNA在染色环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。与传统的EMSA技术相比,染色免疫沉淀技术(CHIP)能真实完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前研究体内DNA与蛋白相互作用的佳方法。


原理

是在活细胞状态下以甲醛固定蛋白-DNA复合物,超声将其随机切断为一定长度范围内的染色小片段,然后加入目的蛋白抗体,通过抗体沉淀靶蛋白-DNA复合物,通过洗脱的方法得到富集的靶蛋白-DNA复合物,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测(PCR分析),从而获得蛋白与DNA相互作用的信息。


应用

1.组蛋白修饰研究

2.转录调控分析

3.药物开发研究

4.有丝分裂研究

5.DNA损伤与凋亡分析


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